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Full text: Molekularbiologische Ansätze im traditionellen Monitoring - der behördliche Blick

A Expertennetzwerk 
Wissen Können Handeln 
Methoden 
2. DNA- Extraktion 
Von jeder Probe wurden 3 x 336 UL Homogenisat in ein 7,5 mL 
Eppendorf Tube pipettiert. 
Diese wurden in der SpeedVac Zentrifuge bei 60°C unter 
Vakuum gesetzt und für 2 Stunden zentrifugiert, bis der ganze 
Ethanol verdunstet war und die Probe getrocknet als Pellet 
vorlag. 
Methoden 
3. PCR Gen Amplifikation 
Ziel der PCR-Reaktion ist es einen Genabschnitt, 
hier ein Fragment des mitochondrialen COI Gens, 
zu amplifizieren. Dafür wurden die Primer 
mICOlintF und jgHCO2198 benutzt. Primer 
wurden mit dem Illumina Overhang bestellt. 
Die DNA-Extraktion erfolgte in denselben Eppendorf Tubes mit 
dem DNeasy PowerSoil Pro Kit (Qiagen) nach den Angaben des 
Herstellers. Die Inkubation mit Proteinase K erfolgte bei 37 °C 
über Nacht (+18 h). 
Melt Peak 
400 
300 
yo 
DB 
35 
u 
X 200 
-] 
100 
0 
4) 
30 
Temperature, Celsius 
18
	        
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